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簡要描述:標(biāo)準(zhǔn)山羊血清(細(xì)菌培養(yǎng)專用):質(zhì)量穩(wěn)定,準(zhǔn)確性高。篤瑪生物全程提供技術(shù)指導(dǎo),確保您實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性還提供免費(fèi)代測服務(wù)。您只需提供代測樣本,七個工作日內(nèi)即可為您提供代測數(shù)據(jù)。歡迎前來咨詢,訂購。
標(biāo)準(zhǔn)山羊血清(細(xì)菌培養(yǎng)專用)
產(chǎn)品描述
山羊血清采集自正常健康的山羊供體,經(jīng)脂質(zhì)萃取和透析后儲存于緩沖液(0.01 M磷酸鈉,0.25 M氯化鈉, pH 7.6)中。常用于各種免疫實驗,起到封閉或?qū)φ盏淖饔谩?/span>
本品用于封閉的常見使用濃度為5%(v/v)。
產(chǎn)品使用
1)山羊血清是以凍干粉形式提供的,本品需要先溶解配制成100%原液后再稀釋使用。溶解方法:用10ml 蒸餾水(dH2O)充分溶解凍干粉(如果不澄清,可對其離心處理),此時得到的即是100%原液。然后按照1:20的比例用緩沖液,如PBS或PBST,稀釋到需要的5%工作液。也可以根據(jù)自身實驗條件,稀釋到合適的工作液濃度。
2)山羊血清以100%原液的形式提供,直接用合適的緩沖液稀釋到需要的工作液。
產(chǎn)品性質(zhì)
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。凍干粉保存于2~8℃。100%原液保存于2~8℃,6個星期穩(wěn)定。建議原液分裝后置于≤-20℃,以延長保存期。重溶后100%原液的有效期1年。
注意事項
1)本品含,對人體有害,請注意適當(dāng)防護(hù)。
2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3)注意無菌操作
4)注意避免反復(fù)凍融。反復(fù)凍融可能產(chǎn)生沉淀,可以通過無菌條件下,3500rpm離心10min除去沉淀
常見問題
血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
2、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
3、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟
5、若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
若血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。
一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補(bǔ)體去活化,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。
標(biāo)準(zhǔn)山羊血清(細(xì)菌培養(yǎng)專用)
鑒別方法
血清
血液凝固析出的淡黃色透明液體 。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。凝收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿最大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如原變成,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。
血漿
血漿是血液的液體成分,血細(xì)胞懸濁于其中。人體含有2750-3300毫升血漿,約占血液總體積的55%。血漿的絕大部分是水(體積的90%),其中溶解的物質(zhì)主要是血漿蛋白,還包括葡萄糖、無機(jī)鹽離子、激素以及二氧化碳。血漿的主要功能是運(yùn)載血細(xì)胞,同時也是運(yùn)輸分泌產(chǎn)物的主要媒介。
將新鮮血液離心,使血細(xì)胞沉降,上層淡黃色清液即是血漿。血漿與血清的區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原等。
正常山羊血清,來源于非免疫的山羊宿主,經(jīng)過脂質(zhì)萃取和含的PBS溶液透析,改善其透明度。推薦用PBS將封閉血清原液稀釋5-20倍,配成5%-20%的工作液,直接滴加在組織切片或者細(xì)胞涂片上,37℃度孵育10-30分鐘,清除血清,勿洗,滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗工作液,37℃孵育1-2h或4℃過夜。注意:封閉用血清中不能含有目標(biāo)蛋白,且與一抗來源不同,可用與二抗相同來源的封閉血清。
待檢樣本會非異性的和蛋白結(jié)合,從而導(dǎo)致背景過高,因此可以用BSA或血清封閉掉這部分非異性的結(jié)合,從這點看,BSA和血清沒有明顯區(qū)別?!?/span>
待檢樣本中可能會有Fc受體,可以和抗體恒定區(qū)結(jié)合,與抗體異性無關(guān),封閉血清中有抗體,因此用血清可以封閉掉一抗及二抗和樣本Fc受體之間結(jié)合。BSA則無法封閉Fc受體
二抗來源的動物血清封閉的是組織上帶電荷基團(tuán)。因為組織中非抗原抗體反應(yīng)出現(xiàn)的非異性背景染色,常見的原因是蛋白吸附于高電荷的膠元和結(jié)締組織成分上。這并不影響接下來一抗的結(jié)合,因為這種結(jié)合是異的,親和力遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于因電荷作用的結(jié)合,因此會競爭勝出。
山羊血漿(抗凝)是通過無菌采集抗凝山羊血,離心取上清制成?!?/span>
使用方法
根據(jù)具體實驗來使用。
注意事項
1、注意無菌操作,避免反復(fù)凍融。
2、血漿凍融后可能出現(xiàn)的絮狀沉淀物,通常是血漿凍融過程中脂蛋白的變性所造成,并不影響產(chǎn)品質(zhì)量,可通過離心除去,離心條件為3500rpm,10min。
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