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兔血清(無菌過濾)
產品描述
兔血清采集自正常健康的山羊供體,經脂質萃取和透析后儲存于緩沖液(0.01 M磷酸鈉,0.25 M氯化鈉, pH 7.6)中。常用于各種免疫實驗,起到封閉或對照的作用。
本品用于封閉的常見使用濃度為5%(v/v)。
產品使用
1)山羊血清是以凍干粉形式提供的,本品需要先溶解配制成100%原液后再稀釋使用。溶解方法:用10ml 蒸餾水(dH2O)充分溶解凍干粉(如果不澄清,可對其離心處理),此時得到的即是100%原液。然后按照1:20的比例用緩沖液,如PBS或PBST,稀釋到需要的5%工作液。也可以根據(jù)自身實驗條件,稀釋到合適的工作液濃度。
2)山羊血清以100%原液的形式提供,直接用合適的緩沖液稀釋到需要的工作液。
產品性質
蛋白濃度(Protein concentration) | 60 mg/mL |
緩沖液(Buffer) | 0.01 M磷酸鈉,0.25 M氯化鈉, pH 7.6 |
防腐劑(Preservative) | 0.05% |
運輸與保存方法
冰袋運輸。凍干粉保存于2~8℃。100%原液保存于2~8℃,6個星期穩(wěn)定。建議原液分裝后置于≤-20℃,以延長保存期。重溶后100%原液的有效期1年。
注意事項
1)對人體有害,請注意適當防護。
2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3)注意無菌操作
4)注意避免反復凍融。反復凍融可能產生沉淀,可以通過無菌條件下,3500rpm離心10min除去沉淀
兔血清(無菌過濾)
常見問題
血清應保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?,再放回冷凍?/span>
將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。
1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。
2、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
3、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。
4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。 [3]
5、若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
若血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。
一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化,而補體所參與的反應有:溶細胞活性,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,增強吞噬作用,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。
鑒別方法
血清
血液凝固析出的淡黃色透明液體 。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。凝收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿最大的區(qū)別。而在凝血反應中,血小板釋放出許多物質,各也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應的物質則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品。
血漿
血漿是血液的液體成分,血細胞懸濁于其中。人體含有2750-3300毫升血漿,約占血液總體積的55%。血漿的絕大部分是水(體積的90%),其中溶解的物質主要是血漿蛋白,還包括葡萄糖、無機鹽離子、激素以及二氧化碳。血漿的主要功能是運載血細胞,同時也是運輸分泌產物的主要媒介。
將新鮮血液離心,使血細胞沉降,上層淡黃色清液即是血漿。血漿與血清的區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原等。
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