人嗜酸粒細(xì)胞(ECF/CCL11)酶聯(lián)免疫試劑盒

ELISA 實(shí)驗(yàn)步驟：

1.包被抗原：稀釋液pH 9.6 碳酸鹽緩沖液，多肽濃度2ug/ml，0.1ml/孔，4oC過(guò)夜，洗凈。

2.1%BSA (pH 9.6 碳酸鹽緩沖液) 封閉，0.1ml/孔，37oC1h，洗凈。

3.稀釋抗血清(可稀釋不同濃度) 0.1ml/孔，37oC 30分鐘，洗凈。

4.稀釋辣根過(guò)氧化物每標(biāo)記的二抗0.1ml/孔，37oC 40分鐘，洗凈。

5.顯色：TMB顯色

A液：四甲基聯(lián)苯胺10mg 溶于DMF1ml中，再用pH5.0檸檬酸緩沖液稀釋100倍.

B液：5ul雙氧水加蒸餾水12.5ml 。

終止液：2N硫酸

A液、B液各一滴，比光顯色10分鐘，終止液一滴。

6.450nm 波長(zhǎng)測(cè)OD值

運(yùn)輸方式：低溫運(yùn)輸

服務(wù)：實(shí)驗(yàn)過(guò)程中專(zhuān)業(yè)的技術(shù)指導(dǎo)

標(biāo)本：血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等

人嗜酸粒細(xì)胞(ECF/CCL11)酶聯(lián)免疫試劑盒

常見(jiàn)問(wèn)題問(wèn)答：

  ①問(wèn)：小鼠乙酰Elisa試劑盒后期數(shù)據(jù)處理中空白的OD值有什么作用？

    答：可以將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本的OD值同時(shí)減去空白的值進(jìn)行計(jì)算 或者都不減  保持同一水平就行

  ②問(wèn)：那我們算出來(lái)的ACH含量為什么出現(xiàn)負(fù)值？

    答：說(shuō)明個(gè)別樣本的濃度很低

        當(dāng)濃度接近第6個(gè)點(diǎn)的時(shí)候  直線(xiàn)方程就有可能計(jì)算出負(fù)值

  ③問(wèn)：小鼠乙酰ELISA試劑盒，組織標(biāo)本 切割標(biāo)本后能用生理鹽水稀釋嗎？還有稀釋的倍數(shù)是多少?

    答：生理鹽水也可以。加入量1:3那樣的

  ④問(wèn)：我想問(wèn)一下，標(biāo)準(zhǔn)品濃度與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值之間是不是線(xiàn)性回歸？檢測(cè)出來(lái)的吸光度值很低一般都存在哪些原因？大部分在0.08左右 ？（大鼠5羥色胺（5-HT）Elisa試劑盒

    答：是線(xiàn)性回歸。檢測(cè)出來(lái)的值比較低 ，樣本、稀釋、操作等，原因很多，但只要在可操作范圍就行

  ⑤問(wèn)：做出來(lái)的結(jié)果：標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度呈線(xiàn)性回歸，但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近，正常未予干預(yù)的大鼠血漿都基本沒(méi)有5-HT         表達(dá)，這是什么原因？（大鼠5羥色胺（5-HT）Elisa試劑盒

    答：原因是：樣本、稀釋、室控和機(jī)器操作等，原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近

人嗜酸粒細(xì)胞(ECF/CCL11)酶聯(lián)免疫試劑盒

  ⑥問(wèn)：一個(gè)孔需要多少量的血清？一個(gè)盒子需要多少血清？

    答：一個(gè)孔上樣量10-50微升。一盒上樣量100微升

  ⑦問(wèn)： 酶標(biāo)板分次使用 剩下的建議怎么保持 ？

    答：要是真的用不完或標(biāo)本不多的情況下。做點(diǎn)處理后：板條和板架都是可拆卸的，可以再用之前拆下4條放置錫箔袋或其他無(wú)污染的袋子，放到冰箱 2-8度保存。

  ⑧問(wèn)：酶標(biāo)包被版是酶標(biāo)板嗎？

    答：是的

  ⑨問(wèn)：請(qǐng)問(wèn)植物茉莉酸和水楊酸檢測(cè)的試劑盒。我們提取擬南芥的，一般取樣量是多少？

    答：1-3g