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簡要描述:上海篤瑪生物科技有限公司長期為高校及醫(yī)院等研究機構(gòu)提供各類品質(zhì)過硬,價格實惠,售后完善的生化試劑,公司擁有完善的庫存及供應(yīng)體系以及高效穩(wěn)定的利純化技術(shù),保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性,相關(guān)活動信息可聯(lián)系客服。猴單胺氧化酶A(MAOA)酶聯(lián)免疫試劑盒
猴單胺氧化酶A(MAOA)酶聯(lián)免疫試劑盒
試劑盒組成
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
20倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 23ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
操作步驟:
1. 加樣:設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔和待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl。注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。每次實驗都應(yīng)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果樣品濃度過高,可以用樣品稀釋液進行稀釋,使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物su標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物su標(biāo)記抗體加99μl生物su標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
3. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物su標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
5. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
6. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測
猴單胺氧化酶A(MAOA)酶聯(lián)免疫試劑盒
結(jié)果分析
根據(jù)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品濃度及對應(yīng)的OD值,利用標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數(shù)據(jù)處理,通過計算得到待測樣品的濃度。
注意事項
在進行ELISA檢測時,需要注意以下幾點:
1. 保證試劑盒的質(zhì)量:選擇質(zhì)量可靠、經(jīng)過認(rèn)證的試劑盒,避免使用過期或質(zhì)量不穩(wěn)定的試劑。
2. 標(biāo)準(zhǔn)化操作:按照試劑盒說明書進行標(biāo)準(zhǔn)化操作,避免操作過程中的人為誤差。
3. 避免交叉污染:在實驗過程中,要特別注意防止樣品和試劑之間的交叉污染,以免影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4. 溫度控制:ELISA檢測需要在恒溫條件下進行,因此要確保實驗過程中溫度的穩(wěn)定和準(zhǔn)確性。
5. 空白吸光度值:在實驗過程中,要特別注意空白吸光度值的穩(wěn)定性,避免其對檢測結(jié)果的影響。
6. 實驗數(shù)據(jù)的處理:對實驗數(shù)據(jù)進行正確的處理和分析,包括對異常值的處理、數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換等,以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
7. 質(zhì)量控制:在實驗過程中,應(yīng)進行必要的質(zhì)量控制,如定期進行室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評等,以確保實驗室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗原理
1. 抗體或抗原的吸附:將待測抗原或抗體吸附到固相載體上,常用的載體有微孔板、玻璃纖維、聚苯乙烯等。這些載體表面具有特殊的化學(xué)基團,能夠與待測抗原或抗體特異性結(jié)合。
2. 酶標(biāo)記的抗體或抗原的結(jié)合:將酶標(biāo)記的抗體或抗原與待測抗原或抗體結(jié)合,形成酶標(biāo)記的抗原-抗體復(fù)合物。酶標(biāo)記的抗體或抗原具有高度的特異性和親和力,能夠與待測抗原或抗體形成穩(wěn)定的復(fù)合物。
3. 底物顯色反應(yīng):當(dāng)酶標(biāo)記的抗原-抗體復(fù)合物與底物溶液接觸時,酶能夠催化底物分解,產(chǎn)生顏色變化。通過測量顏色的變化程度,可以判斷待測抗原或抗體的濃度。
公司簡介
篤瑪生物成立的初衷就定位于以人為本,以品質(zhì)取勝的理念,為我們國家生命科學(xué)研究做一些力所能及的工作。公司主要經(jīng)營的產(chǎn)品有測試盒、標(biāo)準(zhǔn)品、有機試劑以及常用的進口試劑品牌的代理,質(zhì)量保證。多年來我們一直堅守著這個承諾,在工作中自始至終貫穿著為科研服務(wù)-這個一貫的宗旨。我們由衷的感謝海內(nèi)外科學(xué)家、感謝國內(nèi)外廣大科研工作者、學(xué)者予以我們鼎力的支持和理解,我們將在未來的工作中,
百尺竿頭,發(fā)揮優(yōu)勢,勇于開拓、自主創(chuàng)新、敢為人先、鍥而不舍,在生命科學(xué)的道路上,不斷進取,奮發(fā)努力,瞄準(zhǔn)國際生命科學(xué)的前沿,不斷創(chuàng)新研發(fā)新產(chǎn)品。為科研工作提供更好、更人性化的服務(wù)。
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