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人磷酸化Tau蛋白(pMAPT/pTAU) ELISA 試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 更新時(shí)間:2024-09-08

簡(jiǎn)要描述:上海篤瑪生物科技有限公司專業(yè)供應(yīng)各種ELISA試劑盒產(chǎn)品,主要包括:人、 大小鼠、兔、犬、牛、猴、豬、昆蟲、植物、農(nóng)殘等種屬ELISA 試劑盒。
人磷酸化Tau蛋白(pMAPT/pTAU) ELISA 試劑盒

產(chǎn)品詳情

人磷酸化Tau蛋白(pMAPT/pTAU) ELISA 試劑盒

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實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

        在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,最好-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。

液體類標(biāo)本:  包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

1. 血清:

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

3. 尿液:

用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:

檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。

5. 培養(yǎng)細(xì)胞

    檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

6. 組織標(biāo)本

    切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

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人磷酸化Tau蛋白(pMAPT/pTAU) ELISA 試劑盒

注意事項(xiàng):

A 仔細(xì)閱讀說(shuō)明書。

B 檢查試劑盒標(biāo)簽上的有效期。如果超過(guò)有效期,請(qǐng)勿使用。

C 按說(shuō)明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)。

D 標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存。

E 準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,(比如移液器,試管,清洗器,酶標(biāo)儀)。

F 按說(shuō)明書將所用試劑平衡至室溫,根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量。

G 檢查試劑盒內(nèi)每種試劑的貯存條件,保證所有試劑均按照試劑盒內(nèi)說(shuō)明書推薦的條件存儲(chǔ)。

H 檢查不穩(wěn)定或者變質(zhì)的試劑溶液(比如沉淀或變色)。有些試劑,比如標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液或者檢測(cè)稀釋液,可能在設(shè)計(jì)時(shí)就含有沉淀物。所有試劑在滴入酶標(biāo)板之前,必需充分混勻。而由于沉淀物的特性,在加入酶標(biāo)板之前,必需不停攪拌。

I 保證充分的孵育時(shí)間和溫度。

J 切勿使用不同生產(chǎn)批號(hào)的試劑取代現(xiàn)有試劑或混合現(xiàn)有試劑。

K 在混合或溶解蛋白溶液時(shí),避免泡沫產(chǎn)生。

L 在實(shí)驗(yàn)開始之前,安排好實(shí)驗(yàn)流程。

M 在實(shí)驗(yàn)開始之前,清潔工作臺(tái)。

N 若有問(wèn)題,應(yīng)與我公司或代理商的技術(shù)支持聯(lián)系

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實(shí)驗(yàn)步驟

1. 準(zhǔn)備:準(zhǔn)備好所有試劑、材料和器具。

2. 溫育:將包被有特異性抗體的酶標(biāo)板放入37℃溫箱中溫育30分鐘。

3. 加樣:分別向各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本,輕輕混勻。

4. 溫育:將酶標(biāo)板放入37℃溫箱中繼續(xù)溫育30分鐘。

5. 洗滌:清洗酶標(biāo)板,除去未結(jié)合的抗原抗體。

6. 加酶標(biāo)二抗:向各孔中加入酶標(biāo)二抗,輕輕混勻。

7. 溫育:將酶標(biāo)板放入37℃溫箱中繼續(xù)溫育30分鐘。

8. 洗滌:清洗酶標(biāo)板,除去未結(jié)合的酶標(biāo)二抗。

9. 加底物溶液:向各孔中加入底物溶液,輕輕混勻。

10. 顯色:將酶標(biāo)板放入37℃溫箱中繼續(xù)溫育15分鐘。

11. 終止:向各孔中加入終止液,混勻。

12. 測(cè)量:在450nm波長(zhǎng)下測(cè)量各孔的光密度值(OD值)。

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試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說(shuō)明書

1份

1份


封板膜

2片(48)

2片(96)


密封袋

1個(gè)

1個(gè)


酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品:36U/L

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

2-8℃保存

酶標(biāo)試劑

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說(shuō)明書

1份

1份


封板膜

2片(48)

2片(96)



結(jié)果分析

根據(jù)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,利用標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算待測(cè)樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,通過(guò)計(jì)算得到待測(cè)樣品的濃度。

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