中文名稱: 輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒/微量法

測(cè)定方法: 微量法

注意: 正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是目前所發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無機(jī)多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進(jìn)行磷酸化反應(yīng),生成NADP(H)。

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

測(cè)試盒注意事項(xiàng):

影響顯色反應(yīng)的主要因素有哪些?

影響顯色反應(yīng)的主要因素有顯色劑的用量、溶度的酸度、顯色時(shí)間以及干擾離子等。

為了使測(cè)定結(jié)果有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度,如何選擇 的測(cè)量條件?

一般從以下幾個(gè)方面來考慮:

⑴選擇適當(dāng)?shù)臏y(cè)量波長(zhǎng)。一般根據(jù)測(cè)試盒待測(cè)組分的吸收光譜選擇 吸收波長(zhǎng)作為測(cè)量波長(zhǎng)。如果干擾組分在 吸收波長(zhǎng)也有吸收,則應(yīng)根據(jù)“吸收大,干擾小"的原則選擇波長(zhǎng)。

⑵調(diào)價(jià)溶液的溶度,或選用不同厚度的吸收池,控制被測(cè)吸光度在0.2-0.8范圍內(nèi)。

⑶選擇適當(dāng)?shù)膮⒈热芏取?/span>

輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒/微量法優(yōu)點(diǎn)如下:

1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。

2、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。

4、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

5、回收試驗(yàn): X =103.3%。

6、受外界影響因素小:干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。