細(xì)胞培養(yǎng)實驗過程中污染的原因

污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。防備和避免污染是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵之一。一開端就要十分重視，避免污染，不然會前功盡棄，不只時間，并且人力、物力，乃至構(gòu)成無法彌補(bǔ)的丟失。

細(xì)胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有 7 種，分別是細(xì)菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、b毒污染以及非細(xì)胞污染。他們在細(xì)胞培養(yǎng)中污染的特色如下：

1. 細(xì)菌：細(xì)菌在一般倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會污濁變黃，對細(xì)胞成長影響顯著。

2. 支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會污濁，原體感染，國內(nèi)血清許多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。并且它不能用過濾的方法除掉。支原體感染細(xì)胞今后，細(xì)胞病變不很顯著，僅僅漸漸。

3. 黑膠蟲：能夠穿透濾膜，也能夠經(jīng)過空氣傳達(dá)，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細(xì)胞仍是能夠用的。常常是細(xì)胞成長狀況杰出，且觀測到的運(yùn)動物無顯著增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無顯著變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細(xì)胞成長狀況不會有顯著影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會自然消失，除替換血清外無須特別處理。

4. 真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開端很像死細(xì)胞碎片，僅僅它許多許多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，漸漸的會長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌成長的比較慢，不象細(xì)菌那么簡單被發(fā)現(xiàn)，可是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。

5. 原蟲：培養(yǎng)液可細(xì)微污濁，顯微鏡下那些細(xì)微的點狀物數(shù)量十分多，細(xì)微活動，細(xì)胞雖然能夠成長但繁衍速度卻顯著減慢，并且細(xì)胞狀況欠好，邊際不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會與細(xì)胞搶奪養(yǎng)分。這種共生是十分遍及的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站優(yōu)勢所以不會影響到細(xì)胞的正常成長，只有當(dāng)他們抵達(dá)必定的數(shù)量時就會影響到細(xì)胞的成長，終究構(gòu)成惡性循環(huán)。

6. b毒：安排細(xì)胞培養(yǎng)過程中，假如沒有除掉潛在的b毒，就會發(fā)作b毒污染?，F(xiàn)在，從原代猴腎細(xì)胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于 20 種血清性b毒。 雖然b毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng)，但出產(chǎn)疫苗是不安全的。因而，潛在b毒是細(xì)胞大量出產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題

7. 非同種細(xì)胞污染 ：便是細(xì)胞穿插污染，因為細(xì)胞培養(yǎng)操作時各細(xì)胞株所需的器件和溶液沒有嚴(yán)格分開，往往會使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染?，F(xiàn)在，世界上已有幾十種細(xì)胞都被 HeLa 細(xì)胞所污染，致使許多實驗宣告無效。非細(xì)胞培養(yǎng)物所構(gòu)成的化學(xué)成分的污染也偶有發(fā)作，大多是因為細(xì)胞培養(yǎng)所需物品清洗消毒不而帶入一些有毒化學(xué)物質(zhì)所造成的。