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ELISA的類型有哪些

更新時間:2024-04-10      瀏覽次數(shù):191

ELISA的類型有哪些

根據(jù)試劑的來源和樣本的情況以及檢測的具體條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法,按照原理及操作,市面的方法有:

1.間接法ELISA

是檢測抗體的方法,原理為利用酶標(biāo)記的二抗以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體,顯色測定。優(yōu)勢在于待測一抗無需標(biāo)記快速便捷。直接法ELISA與間接法ELISA相似,區(qū)別在于一抗酶標(biāo),檢測孵育也以抗原為主,但直接法ELISA的靈敏度有限,需權(quán)衡使用。

2.夾心法ELISA

又分為雙抗原夾心法和雙抗體夾心法ELISA,原理相似,用于檢測抗體或抗原含量。以雙抗體夾心法為例,捕獲抗體包被在固相載體上,加入抗原或待測樣本結(jié)合,后加入的檢測抗體結(jié)合在抗原上,形成三明治夾心形式。雙抗夾心法是市面最常見與方便分析的方法。


3.競爭法ELISA

小分子抗原與半抗原的檢測方法常用競爭法ELISA,待檢樣本中抗原越多,被結(jié)合的酶標(biāo)抗原的量會減少,彼此形成競爭負(fù)相關(guān)體系,顯色物質(zhì)也就越少,根據(jù)顯色物質(zhì)的比例可擬合得到待測抗原含量。

4.其他方法

a.免疫抑制法測ELISA:固相包被抗原,被檢樣本對底物顯色的抑制程度與樣本中所含抗原的量成正比,二者之差為待測抗原含量,原理類似與競爭法ELISA。

b.阻斷ELISA:目的檢測特異性抗體,也稱為競爭ELISA,原理為固相包被抗原,待測樣本與一抗酶標(biāo)競爭孵育,待檢樣本中抗體越多,顯色越淺,反則反之。非洲豬瘟病毒抗體檢測試劑盒中涉及該法。

c.此外有用于檢測IgM抗體的抗體捕捉ELISA,有固相載體改變的Dot-ELISA(硝酸纖維素膜)和C-ELISA(滌綸布),還有技術(shù)分類的TRFIA和多因子檢測等。



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